Ako spôsobuje kryoprezervácia zvýšené možnosti oplodnenia?
S prirodzeným oplodnením sa tajomstvo mužských pohlavných žliaz čiastočne zmieša s bunkami epidermy, v dôsledku čoho nastáva určitá zmena v pH média, čo vedie k deštrukcii pokrytia lipoproteínov spermií, t.j. k ich aktivácii. V tomto stave je životnosť reprodukčných buniek veľmi obmedzená, čo vylučuje ich ďalšie použitie pri IVF. Preto sa používa metóda kryokonzervácie.
Táto technika výrazne zvyšuje trvanlivosť spermií a umožňuje:
- znížiť motorickú aktivitu spermií;
- poskytuje im dodatočný zdroj energie;
- chráni membrány zárodočných buniek pred deštrukciou;
- zabraňuje akumulácii toxických metabolických produktov;
- blokuje reprodukciu mikroorganizmov v ejakuláte.
Aké médiá sa používajú na skladovanie spermy?
Aby sa uľahčil takzvaný proces rozdrvenia ejakulátu potrebný na izoláciu zárodočných buniek z neho, predzrieďte spermie. Používajú sa špeciálne činidlá.
K dnešnému dňu je bežné používať syntetické médiá na skladovanie spermy, z ktorých každá vyžaduje špeciálne podmienky. Obvykle sa tento typ prostredia skladá z niekoľkých zložiek, zvyčajne aspoň troch. Takže vo svojej štruktúre je možné prideliť cukor, najčastejšie a používajú sa glukóza a laktóza, citrát sodný.
Ak hovoríme o špecifických chemických zlúčeninách, ktoré sa môžu použiť ako médiá na ukladanie spermií, medzi nimi sa môžu nazývať Tris-pufor, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Za akých podmienok je ejakulát uložený?
Technológia zmrazovania a skladovania spermií si vyžaduje dodržiavanie špeciálneho režimu chladenia, ako aj použitie špeciálnych zariadení. V tomto prípade musí byť samotná laboratórna miestnosť nevyhnutne vybavená zariadeniami, ktoré sterilizujú vzduch.
Pred zhromažďovaním ejakulátu sa všetky potrebné zariadenia na kryokonzerváciu, najmä všetky druhy baniek, odmerné valce, pipety, papierové filtre sterilizujú v špeciálnej skrini pri teplote 130-150 stupňov. Pred priamym odberom vzoriek sa umiestňujú do špeciálneho termostatu, ktorý udržuje konštantnú teplotu 37 stupňov.
Po odobratí vzorky spermií muža sa umiestni do sterilnej banky. Teplota skladovania spermií by mala byť konštantná. Proces chladenia sa vykonáva v dvoch etapách.
Ak chcete použiť ejakuláciu, skôr ochladenú konzervovanú, nádoba spolu s nej je umiestnená v teplej vode, kde prebieha pomalé rozmrazovanie. Potom sa použité kryoprotektanty odstránia opakovaným zrážaním spermií na odstredivke. Potom sa samotná semenná tekutina nahradí živným médiom, do ktorého sa následne umiestňujú spermie.